Mô tả quy trình công nghệ sản xuất protease HIV-1 tái tổ hợp:
I) Nhân bản đoạn gen mã hoá protease HIV-1 (HIV-1Pr) bằng PCR từ vector pCR2.1-HIV-1Pr (mã số HQ317454 trên Genbank)
III) Thiết kế biểu hiện gen HIV-1Pr bằng vector pET32a (gen được đưa vào vị trí của cặp enzyme giới hạn BamHI và XhoI của pET32a);
IV) Biến nạp plasmid tái tổ hợp pET32a-HIVPr vào tế bào vi khuẩn E. coli BL21 (DE3) RIL;
V) Cảm ứng biểu hiện gen HIV-1Prtrong tế bào biểu hiện BL21 (DE3) RIL
VI) Tinh sạch sơ bộ loại bỏ các protein không mong muốn bằng rửa tủa tế bào trong đệm B (Tris-HCl 20 mM pH 7,9 có NaCl 100 mM, urea 2M và Triton X-100 1%);
VII) Tinh sạch protease HIV-1 sử dụng hệ thống cột Q-sepharose
VIII) Hồi tính protease HIV-1 bằng thẩm tích trong đệm D (Tris–HCl 20 mM, pH 7,9, NaCl 100 mM, PMSF 1 mM, 10% glycerol và DTT 1 mM) với nồng độ urea giảm dần.